尊龙凯时研发的林可霉素检测试剂盒采用酶联免疫法，旨在高效检测尿液、组织和蜂蜜等样本中的林可霉素（Lincomycin, Lin）。该试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、专用抗体、标准品及其他必要配套试剂组成。

1. 原理及用途

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，通过将样本中的林可霉素与酶标板上的偶联抗原竞争抗林可霉素抗体。之后，加入酶标记物，并使用TMB底物显色。样本的吸光度值与其林可霉素含量呈负相关，通过与标准曲线的比较，可得出样本的林可霉素残留量。

2. 技术指标

2.1 灵敏度

0.05 ppb (ng/ml)

2.2 反应模式

25℃， 30分钟至15分钟

2.3 检测下限

尿液、蜂蜜: 15 ppb; 组织: 3 ppb

2.4 交叉反应率

林可霉素: 100%

2.5 样本回收率

尿样: 90% ± 10%; 组织: 80% ± 10%; 蜂蜜: 80% ± 15%

3. 试剂盒组成

• 酶标板: 96孔
• 标准液: 6种浓度
• 酶标记物: 55 ml
• 抗体工作液: 55 ml
• 底物液A: 6 ml
• 底物液B: 6 ml
• 终止液: 6 ml
• 20×浓缩洗涤液: 40 ml
• 说明书: 1份
• 自封袋: 1个

4. 所需器材和试剂

4.1 仪器

酶标仪、打印机、均质器、氮气吹干装置、振荡器、离心机、移液器、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器

单道20µl-200µl，100µl-1000µl

5. 样本前处理

5.1 样本处理须知

所有实验器具必须洁净，并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。

5.2 配液

• 提取液: 取600 ml去离子水加0.75 ml浓盐酸再加100 ml甲醇，混匀。
• 复溶液: 将2×复溶液用去离子水2倍稀释。
• 工作洗涤液: 将浓缩洗涤液20倍稀释。

6. 酶联免疫实验步骤

将所需试剂从4℃取出，室温平衡30分钟。洗涤液如冷藏时出现结晶，需要恢复到室温后使用。取出微孔板并按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，记录位置。

6.1 加样反应

将标准品或样本50µl/孔加入各自的微孔中，加入酶标记物50µl和抗体工作液50µl，封板后轻轻搅拌，25℃反应30分钟。

6.2 洗涤

揭开封板膜，甩去液体后，每孔加入350µl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，并拍干最后一次。

6.3 显色与测量

每孔加入底物液A和B，各50µl，轻轻搅拌，25℃避光显色15分钟。之后加入终止液50µl，终止反应。最后用酶标仪在450nm下测定每孔的吸光度值。

7. 结果分析

7.1 百分吸光率计算

百分吸光率等于样本平均吸光度值除以0 ppb标准溶液的吸光度值，再乘以100%。

7.2 标准曲线绘制

根据标准液的百分吸光率绘制半对数曲线图，代入样本吸光率读取对应浓度，乘以稀释倍数得出实际浓度。使用尊龙凯时专业分析软件可加速和提高样本分析的准确性。

8. 注意事项

• 室温低于25℃会导致窗口标准的OD值偏低。
• 洗板过程中避免孔内液体干燥，保持标准曲线线性。
• 操作时需保持均匀和彻底。
• 孵育过程中需盖住微孔板以避免光线干扰。
• 请勿使用过期或不同批次的试剂盒。
• 终止液有腐蚀性，避免皮肤接触。

9. 贮藏及保存期

试剂盒应在2-8℃保存，避免冷冻，保质期为1年，具体生产日期见包装盒。